不想挑晶體？原位晶體篩選，測試和結構解析方法

  X射線晶體(ti) 衍射儀(yi) 經曆了快速發展的10年，我們(men) 的光源越來越強，探測器越來越快，數據處理越來越智能。儀(yi) 器的進步，大大提高了我們(men) 的晶體(ti) 數據收集的效率和成功率，讓我們(men) 有更多的時間研究更深入的問題。然而好的晶體(ti) 永遠都是一位的尤其對於(yu) 蛋白質晶體(ti) 來說，獲得能夠衍射的晶體(ti) ，仍然是主要的瓶頸之一。通常，為(wei) 了檢驗蛋白質晶體(ti) 的衍射質量，我們(men) 需要從(cong) 晶體(ti) 板上挑出晶體(ti) ，加上防凍劑，冷凍，放到衍射儀(yi) 上，然後測試。然而所有這些步驟都有可能損壞晶體(ti) 。低溫晶體(ti) 篩選不僅(jin) 耗時耗力，而且我們(men) 沒有辦法避免這些操作過程對晶體(ti) 衍射質量的影響。

  幾年前，在同步輻射出現了原位晶體(ti) 學的方法：快速，方便，可以直接在晶體(ti) 生長環境下研究晶體(ti) 的衍射。原位的方法避免了低溫晶體(ti) 學在晶體(ti) 轉移過程中對晶體(ti) 的損害。同樣在室內(nei) 衍射儀(yi) 上，Bruker D8 VENTURE-ISX STAGE同樣完美地實現了原位晶體(ti) 篩選評估：

  1.切換方便，5分鍾內(nei) 即可完成樣品台的安裝和拆卸

  2.軟件控製，隻需要鼠標點擊即可快速對整個(ge) 晶體(ti) 板的每個(ge) 結晶空進行查看

  3.自動多樣品隊列衍射實驗

  4.快速表征晶胞參數，識別晶體(ti) 以及後續的數據收集

 ▲ ISX Stage mounted on D8 VENTURE

實驗案例：GlucoseIsomerases晶體(ti) 篩選和測試

儀(yi) 器配置：D8VENTURE IµS 3.0，PHOTONII，ISX STAGE

樣品：GlucoseIsomerases結晶初篩48孔板，96個(ge) drop

總時間：1h（查看96個(ge) drop：30min；衍射28個(ge) 晶體(ti) ：30min；晶胞表征：10min）

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晶體(ti) 查看，挑選

 ▲ ISX Stage Software Control

2

確定晶體(ti) 篩選隊列

 ▲ 挑選用於(yu) 自動篩選的晶體(ti)

3

自動隊列晶體(ti) 衍射實驗

 ▲ 30min，6個(ge) 孔，28個(ge) 晶體(ti) 樣品篩選結果

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數據收集

室溫下，原位對4顆晶體(ti) 進行數據收集，然後合並數據，使用MR解析結構。

 ▲ 原位常溫數據采集和結構解析